Uporabnik:Vitosmo/Histologija4
From Wikipedia, the free encyclopedia
Namen priprave tkiva je iz tkiv odstraniti vodo in jo zamenjati z medijem, ki v strjenem stanju omogoča z vzorca odrezati tanke rezine. Biološko tkivo mora podpirati trda matrica, da omogočajo dovolj tanek oddelkov, zmanjšati, drugače tankih rezin (5 µm (μm; 1000 μm = 1 mm) za svetlobno mikroskopijo in 80-100 nm (nanometer; 1,000,000 nanometrov = 1 mm) za elektronsko mikroskopijo) ni mogoče ustvariti. Za svetlobno mikroskopijo se najpogosteje uporablja parafinski vosek. Ker se z vodo ne meša, je vodo kot glavno sestavino vsakega biološkega tkiva najprej iz vzorca odstraniti. Da se iz njih odstrani voda, se vzorci se prenašajo skozi kopeli vse bolj koncentriranega etanola. Temu sledi kopel v hidrofobnem čistilu (npr. ksilenu), ki odstrani alkohol, in končno v staljenem parafinskem vosku, to je sredstvu za prepajanje, ki nadomesti ksilen. Parafinski vosek je za rezanje zelo tankih oddelkov za elektronsko mikroskopijo premehka matrica. Namesto njega se zato uporabljajo smole. Najpogosteje se uporabljajo epoksi smole, poleg njih tudi akrilne smole, še posebej v immunohistokemiji. Debelejše rezine (od 0,35 µm do 5µm) v smolo vsajenih tkiv je mogoče tudi rezati za svetlobno mikroskopijo. Tudi epoksi in akrilne smole se z vodo ne mešajo, tako da je vzorec ravno tako treba dehidrirati, običajno z etanolom.
Ko so vzorci enkrat dehidrirani, očiščeni, in prepojeni s sredstvom za utrjevanje, kot je npr. parafin, se jih pusti, da se sredstvo strdi. Če gre za parafinski vosek, se jih pusti, da se ohladijo, pri epoksi smolah pa se jih segreje, da se smola posuši oziroma strdi. Akrilne smole se polimerizirajo s segrevanjem, ultravijolično svetlobo, ali s pomočjo kemijskih katalizatorjev. Otrdeli bloki z vzorci tkiva so tako pripravljeni za rezanje.
Ker se tkiva, fiksirana s formalinom in vgrajena v parafin (FFPE), lahko hranijo za nedoločen čas na sobni temperaturi, in ker je iz njih mogoče izločiti nukleinske kisline (tako DNK kot RNK) tudi desetletja po fiksaciji, so tkiva FFPE pomemben vir za zgodovinske raziskave v medicini.
Tkivo lahko vgrajujemo tudi z zamrznenjem ne-mastnega vzorca v medij na vodni osnovi. Predhodno zamrznjeno tkivo se vstavi v kalupe s tekočim sredstvom za utrjevanje, ki je običajno glikol na vodni osnovi, OCT, TBS, kriogel ali smola, ki se nato zamrzne v blok za nadaljnjo obdelavo.
Fiksiranje s formalinom vodi v tkivih do razkroja mRNK, miRNK in DNK. Vendar pa obstajajo metode, ki iz tkiv, fiksiranih s formalinom in vgrajenih v parafin, lahko izločijo, razmnožijo in analizirajo tudi te snovi.[1]
Tudi tkiva iz rastlin, gliv in mikroorganizmov je mogoče histološko obravnavati. Njihova struktura se od strukture živalskega tkiva zelo razlikuje. Pri rastlinah se študij tkiv bolj pogosto imenuje rastlinska anatomija, gre za naslednje glavne tipe:
Obstajajo štiri osnovne vrste živalskih tkiv: mišično tkivo, živčno tkivo, vezivno tkivo in epitelno tkivo. Vse vrste tkiva so podtipi teh osnovnih štirih vrst - tako je na primer kri razvrščena med vezivna tkiva, saj so krvne celice suspendirane v zunajcelični plazmi).
V 19. stoletju je histologija postala samostojna akademska disciplina. Francoski anatom Bichat je leta 1801 v anatomijo uvedel pojem tkiva, ime "histologija" pa se je prvič pojavilo v knjigi Karla Meyerja leta 1819.[2][3][4][5]
Histologija je študij mikroskopske anatomije (mikroanatomije) celic in tkiv pri rastlinah in živalih. Običajno gre pri tem za opazovanje celic in tkiv pod svetlobnim mikroskopom ali elektronskim mikroskopom, v vzorcu, ki je bil seciran (narezan na tanke rezine z mikrotomom), obarvan in nato nameščen na mikroskopsko stekelce. Histološke študije se lahko tudi opravljajo na kulturi tkiva, v kateri se izolirane človeške ali živalske celice ohranjajo v umetnem okolju za različne raziskovalne projekte. Možnost vizualizirati mikroskopske strukture in med njimi razlikovati se pogosto krepi s pomočjo histološkega barvanja. Histologija je pomembno orodje za biologijo in medicino.
Artefakti lahko nastanejo med obdelavo tkiva. Obdelava pogosto povzroči spremembe, kot je krčenje, izpiranje posameznih celičnih komponent, spremembo barve v različnih vrstah tkiva in spremembe struktur v tkivu. Ker te so nastale v laboratoriju večina post histologija artefaktov mogoče izogniti ali jih odstraniti, potem ko je odkril. Običajen primer je merkur pigment zaostaja po uporabi Zenker je fiksativa , da se določi oddelek.
Postopek na osnovi zmrznjenih rezin, zmrznjenih v tako imenovanem kriostatu, je hitra metoda za pripravo rezin za histološke namene. Pogosto se uporablja po kirurški odstranitvi tumorjev, ker omogoča hitro odgovoriti na vprašanje, ali je tumor bil v celoti odstranjen.
- Kožno tkivo
- Žilno tkivo
- Talno tkivo
- Merizmatično tkivo
Nobelovo Nagrado za fiziologijo ali medicino sta leta 1906 dobila histologa Camillo Golgi in Santiago Ramon y Cajal. Znani so njuni dvoboji glede tega, kaj slike vzorcev možganov kažejo in kako jih je razumeti. Cajal je bil nagrajen za svojo pravilno teorijo, Golgi pa za izum tehnike za barvanje vzorcev, ki je njuno debato konec koncev omogočila.
Histopatologija, raziskovanje obolelih tkiv pod mikroskopom, je pomembno orodje v anatomski patologiji , saj se za točno diagnozo raka in drugih bolezni običajno zahteva histopatološki pregled vzorcev. Usposobljeni zdravniki, pogosto z licenco patologa, so strokovnjaki, ki opravljajo histopatološki pregled in nudijo na podlagi svojih opazovanj za diagnozo pomembne ugotovitve. Histološke vzorce pripravljajo za pregled usposobljeni strokovnjaki, t.i. histološki tehniki (HT) ali medicinske znanstvenice in znanstveniki, medicinsko laboratorijsko tehnično osebje, ali znanstveniki s področja biomedicine in biomedicinske znanstvene podpore. Področje njihovih dejavnosti se imenuje histotehnologija.
Normalno patterning tkiv in artefakte, ki izhajajo iz tkiva postopek priprave zagotovitev, da vsak, histološki oddelek je edinstven. Kot kos bioloških umetnosti te slike zagotavlja globok vpogled v organizacijo in delovanje našega telesa. Histološki vzorci, ki izgledajo kot vsakdanje predmete ali funkcij, ki se pojavljajo na področju socialnih in znanstvenih skupnosti [6] in celo v histopathology list izdelkih.[7] Histologijo je področje znanosti, kjer se umetnost in znanost zadenejo. To dokazuje, da histologijo lahko cenijo ne samo podrobnosti usmerjena patolog, ampak tudi umetnost ljubeč laik in je kar histologijo in patologija bolj dostopni in manj zastrašujoče kot kompleksna znanost.