![cover image](https://wikiwandv2-19431.kxcdn.com/_next/image?url=https://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/c/c4/PBR322_plasmid.gif/640px-PBR322_plasmid.gif&w=640&q=50)
PBR322
Материал из Википедии — свободной encyclopedia
pBR322 — плазмида, используемая в бактериях E. coli как вектор клонирования. Создана в 1977 году мексиканскими биологами Франциско Боливаром[англ.] и Раймондом Родригесом[1].
![Thumb image](http://upload.wikimedia.org/wikipedia/commons/thumb/c/c4/PBR322_plasmid.gif/640px-PBR322_plasmid.gif)
pBR322 содержит 4361 нуклеотидную пару[2] и состоит из участка репликации ori (взят из плазмиды pMB1[англ.]); гена ampR, кодирующего белок, обеспечивающий устойчивость к ампициллину (взят из плазмиды RSF2124[англ.]) и гена tetR, обеспечивающего устойчивость к тетрациклину (взят из плазмиды pSC101[англ.]). Плазмида содержит уникальные сайты рестрикции для более чем 40 рестриктаз. 11 из этих 40 сайтов находятся внутри гена tetR, причём 2 сайта (HindIII[англ.] и ClaI[англ.]) расположены внутри промотора этого гена. 6 сайтов находятся внутри гена ampR. Участок репликации ori[англ.], заимствованный из плазмиды pMB1, сходен по структуре с ColE1[3]. Он кодирует две РНК (RNAI и RNAII) и один белок (Rom или Rop).
Молекулярная масса плазмиды составляет 2,83⋅106 дальтон[4].
Код в базе данных GenBank — J01749[5].
Нумерацию нуклеотидных пар принято начинать с центральной линии уникального сайта рестрикции EcoRI в направлении гена tet. Ген устойчивости к ампициллину – пенициллиновая бета-лактамаза (англ. penicillin beta-lactamase) с промотерами P1 и P3. P3 является естественным промотором, а P1 создан искусственно лигированием двух различных фрагментов ДНК. Промотер P2 аналогичен P1, однако расположен на противоположной стороне плазмиды и инициирует транскрипцию в направлении гена устойчивости к тетрациклину[5].