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核糖核酸酶H(英語:Ribonuclease H,簡寫為RNase H 或 RNH)是一類在DNA複製中催化DNA-RNA引物雜合體(如岡崎片段)的RNA部分的降解的核糖核酸酶。核糖核酸酶H可水解兩個相鄰RNA鹼基之間的3'-磷酸鍵,但不能水解最後一個RNA核糖核酸與DNA的第一個脫氧核糖核酸之間的磷酸鍵,因此產生帶5'端帶一個核糖核酸的DNA鏈,之後由5'-3'核酸外切酶來切除。
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