Заливка (гистология)

Заливка - наиболее широко распространенный метод консервации материала и изготовления блоков для микротомии. После окончания проводки плотность материала всё ещё недостаточна для получения тонких равномерных срезов на микротоме, поэтому следующим этапом после гистологической проводки является заливка образцов в плотные застывающие среды (парафин, целлоидин, желатин)^[1].

Целлоидин - заливка рекомендуется для трудно режущихся объектов (декальцинированные кости, чешуя, кожа и др.). Серийные срезы получить трудно, метод длителен по времени^[1].

Желатин - для заливки рыхлых и легко распадающихся тканей, подготавливаемых для резки на замораживающем микротоме^[1].

Заливка в парафин

Парафин - светло-жёлтая или белая плотная масса из смеси высокомолекулярных углеводородов, устойчивая к кислотам и щелочам. Различные виды парафина имеют температуру плавления от 27 до 62°С. Для заливки чаще всего используются парафины с температурой плавления 48-56°С. Для эластичности в парафин добавляется пчелиный воск (до 5%). В последние годы часто в лабораториях используют современные готовые парафиновые среды, например «Гистомикс» с температурой плавления 52-54°С, который содержит в своём составе натуральный воск и полимерные добавки^[2].

Заливка в парафин производится при помощи специализированного диспенсера, в котором парафин поддерживается нагретым до температуры +58-60°С, оснащённый нагревательной и охлаждающей платформами. Гистологические кассеты с образцами, пропитанными парафином, извлекаются из гистопроцессора. Образцы помещают и ориентируют в заливочных формах (специальные пластиковые или металлические формочки) необходимым образом при помощи пинцета. Формы наполняют горячим парафином, накрывают и плотно прижимают гистологической кассетой, долив парафин до краев кассеты, и помещают на охлаждающую плату, где парафиновый блок застывает при -10-20°С^[3].

Преимущества заливки в парафин:

• доступность
• быстрота
• возможность получать тонкие срезы до 2 мкм
• залитые в парафин образцы могут храниться годами

Недостатки:

• сжатие заливаемого материала (8 - 20%)
• необходимость подвергать высоким температурам образцы^[1]

Примечания

1. Янин В.Л., Бондаренко О.М., Сазонова Н.А. Учебно-методическое пособие для аспирантов очной формы обучения к практическим занятиям по дисциплине «Методы исследования в цитологии и гистологии». Учебно-методическое пособие. — Ханты-Мансийск: БУ «Ханты-Мансийская государственная медицинская академия», 2015. — 65 с.
2. Семченко В.В., Барашкова С.А., Ноздрин В.Н., Артемьев В.Н. Гистологическая техника: учебное пособие. — 3-е изд. — Омск - Орёл: Омская областная типография, 2006. — 290 с. — ISBN 5-87367-025-0.
3. М.О. Мавликеев, Архипова С.С., Чернова О.Н., Титова А.А., Певнев Г.О., Шафигуллина А.К., Киясов А.П. Краткий курс гистологической техники. Учебно-методическое пособие / под научной редакцией к. м. н., доцента Р.В. Деева. — Казань: Казанский университет, 2020. — 107 с. — ISBN ББК 28с.