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EF-Tu（熱不穩定延伸因子 英語：elongation factor thermo unstable）是原核延伸因子之一。延伸因子在核糖體轉譯蛋白質中有重要作用。t-RNA通過反密碼子與mRNA識別，攜帶在tRNA上的單個胺基酸連接到新生成的肽鏈上，完成一次肽基轉移反應後，下一個胺醯tRNA進入核糖體中的位置繼續合成。
藍色：EF-Tu，紅色：tRNA，上方黃色：GTP
原核延伸因子 EF-Tu 在其中的作用是幫助胺醯tRNA進入核糖體的A位。在細胞質中，EF-Tu會結合胺醯化的或帶電荷的tRNA 分子，形成複合體進入核糖體。
核糖體上有3個供tRNA進入的位置：A位（胺醯tRNA位）、P位（肽醯tRNA位）和E位（釋放位）。tRNA複合體首先進入A位，隨後移動到P位，最後在E位釋放。
當tRNA的反密碼子環與mRNA的密碼子部分在核糖體的A位結合後，如果密碼子-反密碼子的配對是正確的，EF-Tu就會將GTP水解為GDP和磷酸。同時EF-Tu會發生構象變化，使其脫離tRNA（同時也從核糖體中脫離）。此時胺醯tRNA完整地進入A位點，其所攜帶的胺基酸在空間上接近P位肽醯tRNA上的多肽鏈。核糖體催化肽鏈與胺基酸的共價結合，並使在P位點的tRNA（此時已無多肽鏈）移動到E位置並被釋放。
EF-Tu 對轉譯的精確性有三個作用：1.如果tRNA處於核糖體的A位並不匹配mRNA密碼子，它延遲GTP水解，有傾向性的增加不正確tRNA離開核糖體的可能性。2.在EF-Tu從tRNA脫離後，在胺醯tRNA完全進入A位之前，它增加了第二個延遲時間（無論此時tRNA是否匹配）。這個延遲期是不正確匹配tRNA（和與其相連的胺基酸）離開A位的第二個機會，否則不正確的胺基酸將不可逆的插入進多肽鏈。3.EF-Tu會檢查胺醯tRNA，如果不正確的胺基酸結合到tRNA上，EF-Tu不會與其形成複合體。該機制尚未被完全理解[1]。
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- EF-Ts（elongation factor thermo stable，熱穩定延伸因子）
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