逆轉錄PCR,或者稱反轉錄PCR(reverse transcription-PCR, RT-PCR),是聚合酶連鎖反應(PCR)的一種廣泛應用的變形。在RT-PCR中,一條RNA鏈被反轉錄成爲互補DNA,再以此爲模板通過PCR進行DNA複製。

由一條RNA單鏈轉錄爲互補DNA(cDNA)稱作「反轉錄」,由依賴RNA的DNA聚合酶反轉錄酶)來完成。隨後,DNA的另一條鏈通過去氧核苷酸引子和依賴DNA的DNA聚合酶完成,隨每個循環倍增,即通常的PCR過程。原先的RNA模板被RNA酶 H降解,留下互補DNA。

RT-PCR的指數擴增是一種很靈敏的技術,可以檢測很低拷貝數的RNA。RT-PCR廣泛應用於遺傳病的診斷,並且可以用於定量監測某種RNA的含量。(檢測基因表現的方法,參見北方墨點法。)

用途

實時螢光RT-PCR可用於檢測確診嚴重急性呼吸道症候群冠狀病毒2型(2019新型冠狀病毒)。[1]

參考文獻

外部連結

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