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豬人工授精是將人工授精應用於豬的一種技術手段。目前,豬的人工授精在世界各地已經得到了廣泛使用。
目前,世界上每年大約有2500萬頭次豬進行人工授精[1]。其中,超過99%的人工授精使用的是儲存在15℃~20℃下,最多保存3天的液態冷藏精液。
俄羅斯的Ivanow在20世紀初就開始將人工授精應用於豬。20世紀30年代後,豬人工授精得到了更廣泛的研究。1948年,日本的伊藤、丹羽等首先報道利用新鮮豬精液的實際應用技術[2]。1956年,Ploge等人開始了假母豬台的應用。1971年,多位科學家同時報道了豬的冷凍精液技術[3][4][5]。1974年,中東部育種聯合會(East Central Breeders Association)成立美國第一個豬人工授精的商業化公豬站並提供冷凍精液[6]。
中國的豬人工授精技術始於20世紀50年代。20世紀60-70年代,中國開始普及豬人工授精,當時主要使用多次輸精管和自製稀釋液。20世紀80年代,一些企業開始引入工業化生產的稀釋粉和一次性輸精管。1998年9月,廣東省廣州種豬精液中心成立[7],這是中國首家商業化的公豬站[8]。
分為假陰道採集法和徒手採集法。除了這兩種常規的方法外,還有公司研製出了全自動的采精設備,可以自動進行精液採集[9]。
精液在稀釋前需對顏色、氣味、體積、精子活力及形態等性狀進行檢測。一般可以用顯微鏡進行精子密度、活力及精子畸形率測定,通常在測定精子畸形率時會結合染色方法並使用血細胞計數板。在一些條件較好的單位會使用分光光度計或專用的精子密度儀進行密度測定。潔淨的精液一般稍有腥味。稀釋後精子活力太低的精液也會拋棄不用,例如低於70%。另外,精液保存的時間和使用的稀釋粉都會影響精子的活力。
一些機構會根據需要將不同公豬的精液進行混合(混精),以減少繁殖力差的公豬所造成的影響。
豬精液使用專用稀釋劑進行稀釋。稀釋劑一般根據稀釋後精液的保存時間進行劃分。在不同時期,稀釋劑的劃分標準並不一致,如可分為長效(5-7天)、中效(3-4天)和短效(1-2天)[11],也可分為長效(超過4天)和短效(1-3天)[12]。稀釋液的生產商一般都使用分析純級的配料。稀釋劑多數在避光、乾燥的條件下保存。一些精液銷售組織會選擇自己配製稀釋劑。
精液可使用瓶裝和袋裝兩種封裝方式。瓶裝多採用塑料瓶,操作較簡便。但由於瓶子存在固有形態,輸精時需要人為進行擠壓或在底部開口。而袋子一般較軟,輸精時精液可自動流出。有研究認為,袋裝的精液在保存時間、精子活力等方面均優於瓶裝精液[13]。
如果精液沒有立即使用,則需要經過保存、運輸及銷售的過程。精液分裝方式主要有三種,包括精液瓶分裝、精液袋分裝和牙膏管分裝[14]。
一般精液保存時間不得超過3天,但如果使用長效稀釋粉可能會延長這一期限。所有的精液應避光保存在17C。常用的稀釋粉可以保存精液3天左右,長效稀釋粉可以保存7天甚至更長時間。但一般精液在配製好後都會儘快使用。有研究認為,不同的稀釋粉會對母豬的平均窩產仔數和平均窩產活仔數造成影響[15]。稀釋粉的質量也會對冷凍精液解凍後的存活率及復甦率造成影響[16]。
曾經有觀點認為精液在保存期間需要每天搖勻,但研究表明,翻轉種豬精液會對精子質量產生不利影響,因此不再建議在人工授精實踐中使用旋轉方法[17]。
精液保存於17℃左右(15~20℃)的恆溫冰箱中,並每日進行搖勻以防止沉澱。溫度太低會對精子形成冷刺激並造成損傷,而溫度太高則不能降低精子的代謝水平無法延長保存時間。剛剛分裝好的精液並不會直接放入冰箱,而是在冰箱外1個小時左右或者在放在冰箱前使用毛巾等物品包裹好來進行隔熱,讓溫度緩慢下降。冷凍精液的使用率較低,受孕率也低於冷藏精液。
精液運輸時需要使用隔熱材料來控制溫度,多使用泡沫箱。夏天天氣炎熱的地區可能會使用冰袋或冰水進行降溫,但溫度需要控制在17℃左右。在一些車輛運輸的情況下,也可能會攜帶恆溫冰箱進行運輸。而凍精的運輸則需要用到液氮。
豬的輸精多數使用一次性輸精管。多次輸精管也有使用,並在使用後煮沸消毒,並徹底乾燥。
輸精在母豬排卵期進行,輸精次數通常為2~3次,每次超過25億精子。將80~100 mL[18]的精液輸入到子宮頸內。輸精的具體時間與查情頻率有關,但並沒有比較一致的看法[19][20]。
Morris於1997至1998年在荷蘭進行的一項流行病學調查表明,豬精液有潛在傳播疾病的可能[21]。
可存在於公豬精液中的病原體包括布魯氏桿菌、衣原體、細螺旋體、支原體、肺結核、非洲豬瘟病毒、豬瘟病毒、口蹄疫病毒、豬水泡病病毒、日本腦炎病毒、豬圓環病毒2型、豬腸道病毒、豬細小病毒、豬繁殖與呼吸綜合症病毒、豬逆轉錄酶病毒、偽狂犬病毒、疱疹病毒2型和腮腺炎病毒(豬藍眼病)等[22]。
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