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法兰西王国于1494年开始的干预改变了半岛上的权力关系，并再次引起了皇帝对意大利事务的关注。尽管在1529年巴塞罗那条约（西班牙语：Tratado de Barcelona (1529)）签署时，皇帝查理五世成为了意大利的仲裁者，但意大利的统治权落到西班牙国王手中，直到西班牙王位继承战争中
相关的所有权力。与此同时，法国介入了意大利战争（1494-1559），重新激起了皇帝对意大利的兴趣，尽管在1529年《巴塞罗那条约（西班牙语：Tratado de Barcelona (1529)）》签署时，皇帝查理五世成为了意大利的仲裁者，但最终他的领地被传给了他的继承人西班牙国王，所以皇帝在意大