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精液冷冻贮藏(Semen cryopreservation)是指以低温保存精子细胞活性的程序。精液可以透过深低温保存永久保存。若考虑以人类精液进行冷冻贮藏,之后又成功受孕的案例,据文献记载贮藏最长达24年[1]。精液冷冻贮藏可以用在捐精(精子银行),可能捐精者和需要精子者相距距离较远,或是在捐精后一段时间才需要精子,若男性接受输精管切除术或是像化学疗法、放射线疗法等会影响生育能力的手术前,也可能会先将精液冷冻贮藏,保留日后再养育后代的可能性。在1954年时就已有用冷冻精液解冻后成功受孕的例子[2]。
精液冷冻储藏技术广泛应用于男性不孕症患者,及畜牧业的人工繁殖上。对于即将进行化学治疗等细胞毒杀治疗的患者,该技术也能事先保存患者的生殖能力[3]。
最常用的精液冷冻保护剂是甘油(占冷冻保护剂溶液的10%),而甘油溶液中也常加入蔗糖、其他的双糖或三糖。冷冻保护剂溶液会加入蛋黄或大豆卵磷脂,比较使用这两种物质,精液在解冻后,在精子活动力、变形程度、在体外和玻尿酸盐结合的能力以及其DNA的完整性上,两者没有显著的差异[4]。
冷冻保护剂中的其他成份可以增加精子在冷冻后的存活率及受孕率。在冷冻贮藏前,用肝素结合蛋白来处理精子,可以减少精子的冷冻伤害,也减少自由基(Reactive oxygen species)的生成[5]。在冷冻保护剂中加入神经成长因子可以减少精子的死亡速率,增加精子解冻后的活动力[6]。若在冷冻前,用环糊精将胆固醇掺入精子细胞膜中,也可以增加精子活动力[7]。
精液的冷冻会用控制速率的慢速冷却(深低温保存,简称SPF),另一种冷却方式是较新式的快速冷却,称为玻璃化(vitrification)。玻璃化的解冻后活动力以及冷冻存活比例都比慢速深低温保存要高[8]。
最理想的解冻温度是40 °C,不过解冻温度的细微调整对精子活动力、顶体状态、ATP含量以及DNA完整性的影响不大[9]。精液冷冻后的解冻也有许多不同的技术,在Di Santo等人2012年的文献中都有提到[10]。
比较冷冻再解冻一次和三次的精液,在DNA片段化的风险差异不大。前提是精液和其原始的冷冻保护剂一起再冷冻,中间没有经过精子洗涤或其他类似程序,而用来进行人工受精前,会先用密度梯度离心或swim-up进行分离[11]。
有些证据证实精子在冷冻后,单股断裂、DNA缩合及片段化的比例增加,这也会增加后代DNA突变的风险。使用抗氧化剂以及良好的冷冻控温可能可以改善此情形[12]。
在长期的追踪研究中,用冷冻后精液受孕的人和一般人比较,其先天性障碍或染色体畸变的比例相近,还没有证据支持用冷冻后精液受孕的人有较高的风险[12]。
对于精液冷冻储藏的历史能够追溯到1776年,义大利人拉扎罗·斯帕兰札尼尝试使用冰雪保存精子[3]。1949年克利斯朵夫·波尔吉利用甘油冷冻保护的特性[13],大幅改善了精液保存技术。自此,人们开始成功以冷冻储藏的精液,进行各种物种的人工受精[3]。
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