双向电泳

双向凝胶电泳（Two-dimensional gel electrophoresis）是一种等电聚焦电泳与SDS-PAGE相结合，分辨率更高的蛋白质电泳检测技术。双向电泳后的凝胶经染色蛋白呈现二维分布图，水平方向反映出蛋白在等电点上的差异，而垂直方向反映出它们在分子量上的差别。所以双向电泳可以将分子量相同而等电点不同的蛋白质以及等电点相同而分子量不同的蛋白质分开。双向电泳是快速成长的蛋白质组学技术中最流行最通用的蛋白质分离方法。目前2D-PAGE能够在同一块凝胶上同步检测和定量数千个蛋白质^[1]。

双向电泳使用的凝胶

实验室中使用机器将电泳后的蛋白质印渍从凝胶上分离

前处理

• 为了避免分析的时间、资源浪费，需要进行除去杂质，利用分离出不同大小的颗粒层次以方便作业进行^[2]

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两次双向电泳的结果，第一次以橘色显示，第二次则以蓝色显示。两次都有显示的讯号为黑色，橘色讯号只有在第一次电泳结果出现（或第一次远大于第二次），蓝色讯号则只有在第二次电泳出现（或第二次远大于第一次）

• 等电位聚焦
• SDS-PAGE

外部链接

• A 2-D electrophoresis tutorial on the web site of the Parasitology Group at Aberystwyth University
• JVirGel（页面存档备份，存于互联网档案馆） Create virtual 2-D Gels from sequence data.
• fixingproteomics.org（页面存档备份，存于互联网档案馆） Protocols for preparing samples and running 2-D Gels.nnn
• Gel IQ A freely downloadable software tool for assessing the quality of 2D gel image analysis data.

参考资料

1. 双向电泳. 清华大学 （中文（中国大陆））.^{[永久失效链接]}
2. 蛋白质分离 （页面存档备份，存于互联网档案馆）口述：吴启裕 博士整理：张书菀、吴皓芝、吴辰宇、梁晓政