Fort Caroline va ser la primera colònia francesa als actuals Estats Units, estava situada a la riba del riu Saint Johns a l'actual Jacksonville, Florida. Va ser fundada sota el comandament de René Goulaine de Laudonnière el 22 de juny de 1564, com a port segur per a Hugonots. Aquest assentament francès entrà en conflicte amb els espanyols els quals fundaren Saint Augustine, Florida el setembre de 1565, i Fort Caroline va ser saquejat per les tropes espanyoles comandades per Pedro Menéndez de Avilés el 20 de setembre. Els espanyols continuaren ocupant aquest lloc com San Mateo fins a l'any 1569.