即時聚合酶鏈式反應
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即時聚合酶鏈式反應(英語:Real-time polymerase chain reaction)是一種在DNA擴增反應中,以螢光染劑偵測每次聚合酶鏈鎖反應(PCR)循環後產物總量的方法[1]。
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此實驗法已被眾多科學家採用,因為其偵測範圍廣、靈敏度高、準確、專一及快速。PCR的發展因為偵測感染病患的病毒(不過RNA病毒須先反轉錄成DNA才進行PCR)或細菌量、癌症監測、診斷個別基因差異的用藥反應等應用而大幅提高。
PCR的方法是基於偵測目標物在反應前及PCR後產物的量化關係,越早探測到指定螢光值表示目標基因組越多。相對於終端PCR方式(end-point PCR,傳統的PCR配合凝膠電泳,在反應後偵測),qPCR(定量即時聚合酶鏈式反應)有許多優點。其結果可以較快取得且穩定,因為是採用非常敏感的化學螢光,而且不需要再繼續處理PCR反應後的偵測,花費時間與精神的工作步驟便可以省下。此外,因為反應後不需打開管子而減少了操作污染。qPCR分析亦適於更具挑戰性的應用,如多重偵測與高通量分析。